1、白细胞稀释液:2%冰乙酸(冰乙酸2ml,蒸馏水98ml,10g/L亚甲蓝溶液3滴),混匀过滤后备用。稀释液的作用为消除红细胞的搅扰,可不加亚甲蓝。
1、稀释血液:在试管中参加0.38ml白细胞稀释液,用微量吸管精确汲取血样20μl,然后用棉花沿着吸管口方向擦净余血,一起查看血量是否足量。将吸管刺进小试管中稀释液的底部,渐渐排出吸管内的血液,然后汲取上清液清洗吸管3次,当即混匀,制成白细胞悬液;
2、冲池:静置一段时间等红细胞彻底损坏后,再次混匀。汲取10μl,沿盖玻片与计数板之间的缝隙冲入计数池。以计数池充溢为准,如过多、过少或有气泡,则要从头冲池;
3、计数:冲池后静置2-3分钟,待白细胞彻底下沉后,用显微镜低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数,对压线的白细胞选用“记上不记下,数左不数右”的准则。
血常规中白细胞计数(WBC)及分类份额(DC)关于临床辨别感染来说是最基本、最常用的目标,升高和下降的起伏也被查验医生和临床医生用作确诊疾病的手法。
血常规因为个体差异,影响目标的要素极多,且患者不同的疾病、乃至是不同的生理状况会引发血常规产生改动,其在感染方面确诊特异性差,有可能会呈现误诊状况。
①白细胞升高兼并中性粒细胞份额升高,常提示急性细菌性感染,特别是革兰阳性球菌(如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌等)感染。少量病毒感染,如流行性乙型脑炎和流行性出血热也可有上述体现。此外,血液与实体肿瘤、血管炎、成人Still病及肾上腺皮质激素的运用等多种非感染原因,也可引起白细胞及中性粒细胞升高。其生理性增高见于新生儿、月经期、妊娠、临产及心情改变等。
②白细胞总数升高兼并淋巴细胞份额升高常提示急性病毒感染,如传染性单核细胞增多症,若长时间继续升高,需留意与血液系统疾病,如白血病等进行辨别。
③白细胞升高兼并嗜酸粒细胞份额升高常提示寄生虫感染,也可见于结核、变态反应、肿瘤及药物等原因。
①病毒、非典型病原体(如支原体、衣原体、立克次体等)及某些原虫(如疟原虫、黑热病原虫)感染可致白细胞削减。
②在细菌感染中白细胞削减常见于沙门菌感染、结核和布鲁菌病;白细胞正常或削减一起兼并嗜酸粒细胞下降常提示沙门菌感染。应当留意的是,除上面叙述的状况外,某些细菌引起的严峻感染(如脓毒症)时,白细胞总数也可明显削减,常提示病况危重。