血细胞计数板的核算方法

时间: 2025-03-19 20:55:38 |   作者: 血细胞分析仪

  计数室的刻度一般有两种标准,一种是一个大方格分红16个中方格,而每个中方格又分红25个小方格,共400小格;另一种是一个大方格分红25个中方格,而每个中方格又分红16个小方格,一共也是400小格。

  残次数的是每个小格中的细胞数,要算一个大格中的细胞数,一个大格中有400个小格,所以要乘以400。

  每一个大方格边长为1㎜,则每一大方格的面积为1㎜2,盖上盖玻片后,载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜,所以计数室的容积为0.1㎜3。其核算方法如下:

  细胞数 ml=(100小格内的细胞数 100)×400×1000×稀释倍数

  1.视待测菌悬液浓度,加无菌水恰当稀释(斜面一般稀释100倍),以每小格的菌数可数为度。

  3.将菌悬液摇匀,用滴管汲取少量,从计数板中心渠道熄灭的沟槽内沿盖玻片的下边际滴入一小滴(不宜过多),让菌悬液使用液体的表面张力充溢计数区,勿使气泡发生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的剩余菌悬液。

  也能够将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区熄灭渠道沾上菌悬液,避免加盖盖玻片后,形成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使发生气泡)。

  4.静置顷刻,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移。将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转化高倍镜调查并计数。明亮日子细胞的折光率和水的折光率附近,调查时应削弱光照的强度。

  5.计数时若计数区是由16个中方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个中方格(即100小格)的菌数。如果是25个中方格组成的计数区,除数上述四个中方分外,还需数中心1个中方格的菌数(即80个小格)。

  6.关于出芽的酵母菌,芽体到达母细胞巨细一半时,即可作为两个菌体核算。每个样品重复计数2-3次(每次数值不该相差过大,否则应从头操作),按公式核算出每mL(g)菌悬液所含细胞数量。

  7.测数结束,取下盖玻片,用水将血球计数板冲刷洁净,切勿用硬物洗刷或抹擦,避免损坏网格刻度。洗净后自行祈求或用吹风机吹干,放入盒内保存。


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